熒光共振能量轉(zhuǎn)移 (FRET)濾光片

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更新時(shí)間：2024-04-11
產(chǎn)品介紹：熒光共振能量轉(zhuǎn)移 (FRET)濾光片
FRET 是測量兩個(gè)不同位點(diǎn)之間距離以及距離變化的有效工具，其對(duì)距離的變化非常敏感，被稱為 “ 光譜尺 " (spectroscopic ruler) ，其特征距離為 1 - 10 nm。
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熒光共振能量轉(zhuǎn)移 (FRET)濾光片

FRET 濾光片組

FRET 是測量兩個(gè)不同位點(diǎn)之間距離以及距離變化的有效工具，其對(duì)距離的變化非常敏感，被稱為 “ 光譜尺 " (spectroscopic ruler) ，其特征距離為 1 - 10 nm。

如果一個(gè)熒光基團(tuán) ( 供體 ) 的發(fā)射光譜和另一個(gè)熒光基團(tuán) ( 受體 ) 的吸收光譜有重疊，那么當(dāng)兩者的距離在 1 - 10nm 之間時(shí)，供體會(huì)通過偶極 - 偶極相互作用 (dipole - dipole interaction) 將能量以非輻射的方式傳遞給受體，供體回到基態(tài)而不發(fā)射熒光，同時(shí)受體被激發(fā)，衰變到基態(tài)時(shí)發(fā)射熒光，這一過程稱為熒光共振能量轉(zhuǎn)移。

FRET 效率值可通過熒光強(qiáng)度或者熒光壽命的測量得到，計(jì)算公式為：E = 1 - FDA/FD 或 E = 1 - τDA/τD其中，FD 為受體不存在時(shí)，供體的熒光強(qiáng)度；FDA 為受體存在時(shí)供體的熒光強(qiáng)度。τD 為受體不存在時(shí)，供體的熒光壽命；τDA為受體存在時(shí)，供體的熒光壽命。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求或者顯微鏡配置的不同，FRET 濾光片可以采用不同的搭配。在供體單激發(fā)的配置中，只包含一個(gè)激發(fā)片用來激發(fā)供體，包含兩個(gè)發(fā)射片用來接收供體和受體的熒光。兩個(gè)發(fā)射片需要安裝在濾光片轉(zhuǎn)輪上，通過轉(zhuǎn)輪切換不同的發(fā)射片，分別進(jìn)行供體和受體的熒光接收。如果將發(fā)射片安裝在分光器件中，則需要額外配置一個(gè)用于分光的二向色鏡。

在有些實(shí)驗(yàn)中，需要對(duì)受體進(jìn)行激發(fā)，比如確認(rèn)所有受體分子的分布，對(duì)受體分子進(jìn)行光漂白等。這種配置中包含兩個(gè)激發(fā)片分別激發(fā)供體和受體，包含一個(gè)雙波段二向色鏡和兩個(gè)發(fā)射片。兩個(gè)發(fā)射片需要安裝在濾光片轉(zhuǎn)輪上，通過轉(zhuǎn)輪切換不同的發(fā)射片，分別進(jìn)行供體和受體的熒光接收。如果將發(fā)射片安裝在分光器件中，則需要額外配置一個(gè)用于分光的二向色鏡。

ET 系列 - 寬場 FRET 濾光片組 ( 供體單激發(fā) )

FRET 探針對(duì)	激發(fā)片	激發(fā)二向色鏡	發(fā)射片 (供體)	發(fā)射片 (受體)	分光二向色鏡
BFP/GFP	ET395/25x	T425lpxr	ET455/50m	ET525/50m	T495lpxr-UF
CFP/YFP	ET436/20x	T455lp	ET480/40m	ET535/30m	T505lpxr-UF
GFP/RFP	ET470/40x	T495lpxr	ET525/50m	ET630/75m	T570lpxr-UF
Cy3/Cy5	ET545/25x	T565lpxr	ET605/70m	ET700/75m	T660lpxr-UF

ET 系列 - 寬場 FRET 濾光片組 ( 供體和受體雙激發(fā) )

FRET 探針對(duì)	激發(fā)片 (供體)	激發(fā)片 (受體)	激發(fā)二向色鏡	發(fā)射片 (供體)	發(fā)射片 (受體)	分光二向色鏡
BFP/GFP	ET402/15x	ET490/20x	69002bs	ET455/50m	ET535/50m	T495lpxr-UF
CFP/YFP	ET430/24x	ET500/20x	69008bs	ET470/24m	ET535/30m	T505lpxr-UF
GFP/RFP	ET470/40x	ET572/35x	59022bs	ET525/50m	ET632/60m	T570lpxr-UF
Cy3/Cy5	ET545/25x	ET640/30x	59007bs	ET595/50m	ET690/50m	T660lpxr-UF

ET 系列 - 溶液單分子 FRET / FRET-FCS 濾光片組

FRET 探針對(duì)	激光	激發(fā)片 (受體)	激發(fā)二向色鏡	發(fā)射片 (供體)	發(fā)射片 (受體)	分光二向色鏡
BFP/GFP	405 nm	ZET405/20x	ZT405rdc-UF1	ET455/50m	ET525/50m	T495lpxr
CFP/YFP	442 nm	ZET436/20x	ZT442rdc-UF1	ET480/40m	ET535/30m	T505lpxr
GFP/RFP	488 nm	ZET488/10x	ZT488rdc-UF1	ET525/50m	ET630/75m	T570lpxr
Cy3/Cy5	532 nm	ZET532/10x	ZT532rdc-UF1	ET575/50m	ET700/75m	T660lpxr

ET 系列 - 表面單分子 FRET 濾光片組

激光	激發(fā)片	激發(fā)二向色鏡	多波段	發(fā)射片 (供體)	發(fā)射片 (受體)	分光二向色鏡
405/488 nm	ZET405/488x	ZT405/488rpc-UF2	ZET405/488m	ET450/50m	ET525/50m	T495lpxr-UF
442/514 nm	ZET442/514x	ZT442/514rpc-UF2	ZET442/514m	ET480/40m	ET545/40m	T505lpxr-UF
442/532 nm	ZET442/532x	ZT442/532rpc-UF2	ZET442/532m	ET500/40m	ET585/65m	T525lpxr-UF
488/561 nm	ZET488/561x	ZT488/561rpc-UF2	ZET488/561m	ET525/50m	ET610/75m	T560lpxr-UF
488/594 nm	ZET488/594x	ZT488/594rpc-UF2	ZET488/594m	ET525/50m	ET645/75m	T570lpxr-UF
488/640 nm	ZET488/640x	ZT488/640rpc-UF2	ZET488/640m	ET525/50m	ET655lp	T570lpxr-UF
532/640 nm	ZET532/640x	ZT532/640rpc-UF2	ZET532/640m	ET585/65m	ET655lp	T635lpxr-UF

分光二向色鏡規(guī)格

廠家	型號(hào)	分光二向色鏡	發(fā)射片
Carin Research	OptoSplit II, OptoSplit II ByPass, Optosplit III, Multisplit V2, TwinCam, MultiCam	UF2: 26 x 38 x 2mm, Flatness	25mm 直徑，3.5mm 厚度
Photometrics	DC2, DV2	UF1: 18 x 26 x 1mm, Flatness
	DVΛ	UF2: 26 x 38 x 2mm, Flatness
	QV2	UF1: 12.5mm Diameter, 1mm thickness Flatness
Hamamatsu	W-View Gemini	UF1: 25.5 x 36 x 1mm, Flatness UF2: 25.5 x 36 x 2mm, Flatness
Hamamatsu	W-View Gemini-2C
Andor	Optosplit III	UF2: 26 x 38 x 2mm, Flatness waves/inch

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